生物安全柜的分类和使用注意事项

时间:2023-06-15 15:00:02 公文范文 来源:网友投稿

张弦

【关键词】生物安全柜;
工作原理;
注意事项

生物安全柜是科研人员的一级防护屏障,其主要作用是保护操作样本不被外界污染的同时,更好地保护操作者不被所操作的病原微生物侵害,能够防止生物实验过程中某些含有危险性或未知性的生物颗粒进入安全柜中,造成试验样本被污染。生物安全柜广泛应用于微生物学、生物医学、基因工程、生物制品等领域的科研、教学、临床检验和生产中,是实验室生物安全一级防护屏障中最基本的安全防护设备。

生物安全柜的工作原理主要是将柜内空气向外抽吸,使柜内保持负压状态,通过垂直向下的气流流动来保护工作人员。外界空气经过高效空气过滤器过滤后进入生物安全柜内,防止样品被污染。而安全柜内的空气也需要经过滤器过滤后再排放到大气中,以保护大气环境。生物安全柜作为一级防护措施,正确地使用生物安全柜是非常必要的。一旦错误使用生物安全柜,不仅不能保护进行检测工作的医疗人员,还容易造成病毒的扩散,引发公共安全问题。

1 生物安全柜注意事项

生物安全柜是否有电动前窗各有利弊,国外大型生物安全柜生产企业会给生物安全柜配备双系统,避免因供电系统出现故障而导致微生物危害性物质外漏。但在国内,大多数生物安全柜生产企业生产的产品并没有此项配置。电动前窗一旦在实验过程中由于供电问题出现故障,就会对环境和实验人员产生很大的危害,造成无法弥补的损失。电动控制的前窗虽然能给实验人员提供便捷,但同时也存在一定的安全隐患。

2 生物安全柜分类

生物安全柜分为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级,用于不同程度的生物安全等级的环境使用。

2.1 Ⅰ级生物安全柜

Ⅰ级生物安全柜能保护环境和人员避免受生物的侵害,但不能保护产品免受污染。该生物安全柜本身没有动力风机,主要是通过外接通风管中的风机带动气流,不能有效地保护安全柜内实验样品,目前国内已很少使用。

2.2 Ⅱ级生物安全柜

Ⅱ级生物安全柜既能保护实验样品,同时还能保护实验室人员和周围环境。因此,它是目前國内市场上应用较为广泛的生物安全柜。根据安全柜的排风循环的方式和入口处气流速度,Ⅱ级生物安全柜可分为A1、A2、B1、B2四个型号。

1)A1 型安全柜

空气通过安全柜工作台前窗口吸入,国家校准规范中要求最小的平均风速应不低于0.38 m/s,经过高效过滤器处理后,气流向下流动,大部分气体是过滤的原有循环气体,有一小部分是通过过滤器新吸入的补充气体。原有的循环气体有一小部分通过排气口高效过滤器过滤排放到实验室内。Ⅱ级生物安全柜A1 型适用于国内非常熟知的并且容易控制的病原体,该病源不会大范围引发健康成人类疾病,对周围环境和操作人员存在较小的危险。

2)A2 型安全柜

空气通过安全柜工作台前窗口吸入,国家校准规范中要求最小的平均风速应不低于0.51 m/s,经过高效过滤器处理后,气流向下流动,大部分气体是过滤的原有循环气体,有一小部分气体是通过过滤器新吸入的补充气体。原有的循环气体有一小部分通过排气口高效过滤器过滤排放到室外,不再返回实验室内。Ⅱ级生物安全柜A2 型适用于对试验人员和周围环境有中度潜在危险的病原体。

3)B1 型安全柜

空气通过安全柜工作台前窗口吸入,国家校准规范中要求最小的平均风速应不低于0.51 m/s,经过高效过滤器处理后,气流向下流动,有一小部分气体是过滤的原有循环气体,大部分气体是新吸入经过过滤器过滤得到的补充气体,原有的循环气体大部分都通过排气口高效过滤器过滤排放到室外,不再返回实验室内。Ⅱ级生物安全柜B1 型适用于临床、诊断、教学、研究,在该级别安全柜中开展有较高危险性病原体的试验。

4)B2 型安全柜

空气通过安全柜工作台前窗口吸入,国家校准规范中要求最小的平均风速应不低于0.51 m/s,经过高效过滤器处理后,气流向下流动,全部气体都为经过过滤器过滤后新吸入的气体,原有的循环气体全部通过排气口高效过滤器过滤排放到室外,不再返回实验室内。Ⅱ级生物安全柜B2 型适用于对生命有高度危险的病原或外源性病原。

2.3 Ⅲ级安全柜

Ⅲ级安全柜为完全密封式生物安全柜,通过特制手套与柜子内部相连,能够为实验人员、实验样品、周围环境等提供保护。实验样品的进入是通过双门分动箱进入安全柜内。一般的Ⅲ级安全柜会配备双排气HEPA过滤器。

3 使用安全柜注意事项

3.1 存放位置的要求

生物安全柜工作台的前窗操作口处具有一定的负压并有一定的气流流入流速,容易受到外界各类气流的干扰。实验人员靠近或路过生物安全柜附近时会形成新的气流,干扰生物安全柜的稳定气流,甚至开关门产生的气流都会影响到生物安全柜内的气流稳定性。因此,生物安全柜摆放位置应尽量远离人员活动频繁、有气流流动以及可能会产生扰乱气流的地方,生物安全柜的后方及两个侧面要与墙面或其他不易移动的物品之间留有一定的空间,便于对安全柜的维修和维护,在生物安全柜的正上方要留有30 cm以上的空间,便于外排式高效过滤器的排气量达到标准要求。

3.2 操作人员注意事项

实验操作人员进行生物安全柜实验时,双手缓慢进入生物安全柜内,尽量保持开口处气流的相对稳定,手臂进入生物安全柜后等待大约1 min,生物安全柜自动调整完毕后,让生物安全柜内气流扫掉手臂表面的微生物污染颗粒,再进行下一步操作。同样在开始实验之前,应将所有实验样品以及相关的物品置于安全柜内一定的时间,保证其表面的微生物污染颗粒达到要求,尽可能减少手臂进出安全柜内的次数,保证生物安全柜发挥其应有的作用。

3.3 物品放置

生物安全柜内所有物品不能挡住进气格栅,放入生物安全柜内的所有的物品应用体积浓度为70%的乙醇来消毒。所有的物品应与安全柜前面的格栅和后面工作台面风口位置保持一定的距离,保证安全柜内气流通畅,同时安全柜内避免放置和使用能产生震动的仪器,以避免影响气流的稳定性。安全柜内不要放置能产生气溶胶的设备,实验必备品应靠近安全柜的后部放置。有生物危害性的废弃体积较大的物品,应该固定放在安全柜内的某一侧,避免气体流动把危害物带入试验样品。

耐高压灭菌的生物危害性废弃物和相关的吸管盛放盘类物品不应放在安全柜的外面,避免使用时手臂频繁进出安全柜,干扰安全柜气流稳定性,影响安全柜的使用效果。柜内两种及以上物品需移动时,要遵循低污染性物品向高污染性物品移动原则,以免造成大面积污染。

3.4 操作和维护

大多数生物安全柜允许全天24 h 工作。经研究发现,任何等级的生物安全柜连续工作都能有效控制实验室污染颗粒数量。在工作开始前和工作结束后,都应让生物安全柜运行一段时间,时间为30 min 左右,保证内部环境的净化,以便于下次使用。生物安全柜的所有维修工作应由有资质的专业人员进行。

3.5 紫外灯使用

生物安全柜如果有紫外灯并经常使用,应按时对紫外灯进行清洁,以免影响其杀菌效果。房间中有人员长时间操作生物安全柜时,应戴好防护眼镜,穿好防护服,以保护眼睛和皮肤。

3.6 明火

生物安全柜内尽量不要使用明火。明火燃烧时会使周围环境中产生微小颗粒杂质,随着气流被带入过滤器的滤膜区域,这些高温杂质会损伤滤膜。若必须使用明火,应尽可能使用低火苗火源或通过外置设备罩住火苗位置,避免高温杂质向上流动。另外,因热胀冷缩效应,使用明火会对周围的气流产生影响,影响安全柜内气流的稳定性,并且在处理易燃易爆试验样品时,会造成一定危险。

3.7 实验室中微生物溢出应急措施

实验室中应有处理溢出物的规章制度和实验室操作规则,每名实验室的成员都应在操作前阅读并了解这些规章制度。一旦在安全柜中發生危害物品溢出时,应及时正确有效处理,并在处理过程中尽可能减少气溶胶的生成。

3.8 检验

生物安全柜定期使用一段时间以后,操作人员应注意使用过程中安全柜的变化,如发现异常或到了使用有效期,应请专业人员按照国家校准规范对生物安全柜的主要参数进行检测,检查其是否符合国家及国际标准,如有不符合项应及时整改再进行检测,检测合格后再使用。

3.9 清洁和消毒

每次实验结束后应对安全柜进行清洗和消毒,避免因生物安全柜内样品中的微生物生长繁殖而产生大量污染物粒子。因此,待实验结束后,尽可能将安全柜内所有物品都进行消毒,并移出安全柜,对安全柜内的工作台面和侧壁擦拭清洗和消毒。擦拭过程中建议安全柜一直处于运行状态,擦拭结束后运行10 min以上再关闭安全柜。

3.10 人员防护

在进行Ⅰ级和Ⅱ级生物安全的操作时,可穿着普通试验服,在进行Ⅲ级生物安全柜的操作时应穿着医用防护服,手套应套在隔离衣的外面,并佩戴口罩和安全眼镜。

4 结语

生物安全柜在我国各类安全实验室中被广泛应用,目前在使用生物安全柜时存在以下问题:重视使用却轻视维护;
实验室管理人员和实际使用人员的安全意识不够强;
各实验室的生物安全柜管理制度不够完善等。

生物安全柜使用单位和实验室应对生物安全柜定期维护及检验,在发现异常情况时应及时处理。相关的卫生行政部门要加强对重点实验室的生物安全柜进行有效管理和监督。只有正确地使用和维护生物安全柜才能保障实验室人员和样品的安全,才能做好生物安全实验。

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